的干燥成熟种子，具有活血祛瘀、润肠通便、止咳平喘的功效，用来医治经闭痛经、癥瘕痞块、肺痈肠痈、跌扑损伤、肠燥便秘、咳嗽气喘。桃仁的主要化学成分有苷类、脂肪油类、蛋白质、氨基酸、挥发油、黄酮及其甾醇等。桃仁的现代药理活性有抗凝血、抗血栓、预防肝纤维化、抗氧化、抗炎、抗肿瘤、神经保护及润滑肠道等
历代桃仁炮制方法最重要的包含净制、燀制、炒制。炒制最早出现在南齐时期的《刘涓子鬼遗方》：“去皮炒切之”。《中国药典》2025年版炒桃仁的炮制方法为“取燀桃仁，照清炒法（通则0213）炒至黄色”，外观性状为“表面黄色至棕黄色，可见焦斑”。一般认为，如需用行血功效，桃仁应保留果皮和尖，使用生品；而要发挥润燥活血功效，宜去除皮、尖，经炒黄炮制后入药[6]。现代研究表明，生、燀、炒、蒸等桃仁炮制品以及桃仁皮的比较，抗凝血、抗血栓、抗炎、肠胃推进等功效均以生品为最佳；燀、炒、蒸等加热处理后，以上药效均有不同程度的降低[7]。因此，临床用药时应根据不同功效的需求，选择正真适合的桃仁炮制品。
热分析技术是在程序控制温度下，测量物质的物理性质与温度关系的一类技术。该技术具有简单易操作和灵敏迅速的特点，可以有效的进行微量试样的检测。利用该技术进行药物在加热或冷却过程中产生的物理变化和化学变化分析，可以为药物分析提供热力学参数[9-10]。在中药炮制领域，热分析技术同样发挥着无法替代的作用[11]。通过对炮制过程中中药成分热性质的变化进行实时监测，可以精确控制炮制工艺的温度和时间，优化炮制方法，从而确保中药炮制后的药效和安全性。
本研究基于热分析技术，对炒桃仁的炮制工艺进行研究，对炒桃仁的炮制温度范围进行量化，选取苦杏仁苷、乙醇浸出物、脂肪油以及外观色泽为评价指标，并以AHP-CRITIC法结合Box-Behnken设计-响应面法（Box-Behnken design-response surface method，BBD-RSM）优化炒桃仁最佳炮制工艺。此外，使用盐酸肾上腺素建立急性血瘀大鼠模型，喂食大米并禁水，建立小鼠便秘模型，对桃仁炒制前后进行活血化瘀和润肠通便药效进行评价研究，探讨生桃仁和炒桃仁的“生熟异治”作用，为进一步阐释其炮制前后药性的改变以及规范炮制工艺、制订合理的饮片品质衡量准则提供参考。
STA449-F5型热重-差热同步热分析仪，德国耐驰仪器制造有限公司；AR223CN型分析天平，美国奥豪斯公司；ABL系列多功能炒药机，兰州阿泊罗电子设备有限责任公司，规格25 L，投料量≥50 g；RE-52AA型旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；赛默飞U-3000型高效液相色谱系统配备紫外（UV）检测器，美国赛默飞世尔科技（中国）有限公司；C-Eye型电子眼，上海保圣实业发展有限公司；SA-5600型全自动血液流变测试仪，北京赛科希德科技股份有限公司；RAC-1830型全自动凝血分析仪，深圳雷杜生命科学股份有限公司。
2.1.1样品制备称取净桃仁200 g，投入10倍量沸水中，保持微沸5 min，捞出，浸冷水中放凉，搓去种皮后，于50℃烘箱内烘干，得燀桃仁[12]。外观性状呈表面乳白色，略有香气。称取燀桃仁100 g，粉碎，过2号筛，备用。
2.1.2热分析检测以模拟空气（氮气-氧气4∶1）为载气，升温速率为10℃/min，体积流量为60 mL/min。分别取燀桃仁粉末、苦杏仁苷、棕榈酸、油酸、亚油酸对照品，试样量（30±5）mg，水平均匀分散于坩埚中，在模拟空气的条件下对其进行热解特性研究，从室温升至600℃，每份样品平行3次实验，取均值进行数据分析。
2.1.3热分析实验结果与分析如图1所示，由燀桃仁燃烧热解特性可知，室温至194.5℃时热失重率为4.18%，为脱水阶段；194.5～385.3℃时热失重率为50.91%，385.3～475.4℃时热失重率为21.72%，分别在358.8、407.1℃时出现强度为7.28%/min与3.93%/min的热解燃烧阶段热失重速率峰极值，可能是由于脂肪酸的氧化分解及蛋白质等大分子物质的降解；475.4～600℃时热失重率为17.89%，此阶段可能因为碳化产物的完全燃烧。
℃时热失重率为4.05%，可能是微量结合水的散失；258.6～365.3℃阶段为主要热解阶段，热失重率为74.81%，在316.2℃时出现强度为18.30%/min的热解燃烧阶段热失重速率峰极值，这一阶段苦杏仁苷有几率发生分解，糖苷键断裂、产生氢氰酸等；365.3～600℃时热失重率为25.16%，可能是由于剩余苷元骨架进一步碳化。
由十六烷酸燃烧热解特性可知，120.12～291.02 ℃阶段为主要热解阶段，热失重率为98.99%，在261.3℃时出现强度为20.88%/min的热解燃烧阶段热失重速率峰极值。由亚油酸燃烧热解特性可知，160.3～348.5℃阶段为主要热解阶段，热失重率为85.59%，在267.1℃时出现强度为16.46%/min的热解燃烧阶段热失重速率峰极值。由油酸燃烧热解特性可知，174.5～357.8℃阶段为主要热解阶段，热失重率为84.75%，在283.7℃时出现强度为17.04%/min的热解燃烧阶段热失重速率峰极值。
十六烷酸、亚油酸和油酸均在260～290℃时出现较强的热失重速率峰，表明其在这一阶段快速氧化分解。对比燀品热解燃烧特性曲线，结合炮制适度理论，可推测桃仁炒制温度起点为高于120.11℃，结合苦杏仁苷热重-微商热重（thermogravimetric- derivative thermogravimetry，TG-DTG）分析曲线可知，桃仁炒制温度终点为不高于291.02℃。由此可推测，炒桃仁最佳炮制温度为120.11～291.02℃。
2.2.1色谱条件参照《中国药典》2025年版一部桃仁项下苦杏仁苷的含量测定方法。采用U-3000型HPLC系统配备UV检测器检测；SPODS-AQ色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；以甲醇-水（20∶80）为流动相；等度洗脱30 min，体积流量0.8 mL/min；检测波长210 nm，柱温30℃；进样量10 μL。
2.2.2对照品溶液的制备取苦杏仁苷对照品适量，精密称定，配制成质量浓度分别为0.02、0.04、0.06、0.08、0.10、0.12 mg/mL的对照品储备溶液。
2.2.3供试品溶液的制备取炒桃仁粉末0.3 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加石油醚（60～90℃）50 mL，加热回流1 h，放冷，滤过，弃去石油醚液，药渣挥干溶剂，放入具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50 mL，称定质量，加热回流1 h，放冷，再称定质量，用70%甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过。精密量取续滤液5 mL，置10 mL量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
2.2.5线性关系考察吸取“2.2.2”项下制备好的对照品溶液，运用“2.2.1”项下色谱条件进行测定，以峰面积为纵坐标（Y），苦杏仁苷质量浓度为横坐标（X），绘制标准曲线，进行线性回归，得回归方程为Y＝121.420X－0.013 2，R2＝0.999 7，线～0.12 mg/mL。2.2.6
样品测定采用“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，并按照“2.2.1”项下色谱条件进行测定，代入标准曲线回归方程，计算各桃仁样品中苦杏仁苷的含量。苦杏仁苷对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液的HPLC色谱图见图2。
2025年版四部“通则2201”中醇溶性浸出物测定法项下的热浸法进行测定，溶剂为乙醇。2.4
[13]进行提取。取炒桃仁粉末4 g，精密称定，加石油醚（60～90℃）100 mL，超声提取1 h，提取液放冷至室温，滤过，收集滤液，滤液水浴减压挥去石油醚至无醚味，置已恒定质量的蒸发皿中，100℃干燥1 h，冷却至室温，精密称定，计算脂肪油的含量。脂肪油含量＝
C-Eye型电子眼，光圈值为f/10，曝光时间为1/4 000 s，打开顶部光源以消除背景，电子眼稳定后，使用24卡进行校正，记录红绿色轴（a*）、黄蓝色轴（b*）及亮度（L*）数据。样品的总色度值，可以用E*ab表示，E*ab＝(L*2＋a*2＋b*2)1/2，E*ab数值越大，颜色越浅，L*代表物体的明亮度，0～100表示从黑色到白色；a*的数值由正到负对应表示颜色由红到绿，b*的数值由正到负对应表示颜色由黄到蓝。随着炒桃仁炮制程度的加深，E*ab数值越来越低，符合炮制过程中炒桃仁不断加深的特征。参照《中国药典》2025年版炒桃仁的外观性状制定炒桃仁外观色泽评分标准如下：乳白色（E*ab77.50～79.00），1～4分；黄白色（E*ab73.00～77.50），5～7分；黄色至棕黄色，可见焦斑（E*ab63.70～73.00），8～10分；棕褐色（E*ab53.72～63.70），1～4分；深褐色至黑色（E*ab37.74～53.72），0分。2.6
AHP法确定主观权重系数（wi）AHP法作为一种主观赋权法，可以依据梯阶层次结构对应的重要程度进行定性判断并予以量化，确定各指标成分wi。实验发现，桃仁炒制前后，苦杏仁苷、脂肪油、乙醇浸出物等成分的含量均存在改变，且苦杏仁苷是《中国药典》2025年版规定的质量控制成分，有研究表明，桃仁在炮制前后苦杏仁苷含量存在一定的差异[14]。外观色泽评分可从外在质量直观反映出炒桃仁的质量优劣，同时结合电子眼技术客观地判断炒桃仁的炮制程度。因此，依据重要程度确定各指标的优先顺序为外观色泽＝苦杏仁苷＞脂肪油＞乙醇浸出物。通过构建两两比较的判断矩阵，对各指标重要性进行赋值，得到外观色泽、苦杏仁苷、脂肪油、乙醇浸出物的wi分别为0.350 7、0.350 7、0.189 2、0.109 3。一致性比率（consistency ratio，CR）为0.004（小于0.1），根据结果得出该wi分配合理可信。结果见表1。
CRITIC熵权法计算客观权重系数（wj）CRITIC法是依照评价指标的对比强度和指标之间的冲突性来综合衡量指标的wj。将单因素试验中的数据来进行极差标准化处理，极差标准化公式为(实测值－最小值)/(最大值－最小值)×100，再导入SPSS AU软件进行CRITIC权重分析，得到外观色泽、苦杏仁苷、乙醇浸出物、脂肪油的wj分别为0.211 4、0.265 2、0.310 2、0.213 1。2.6.3
单因素实验优化炒桃仁炮制工艺通过热分析实验结果，得到炮制温度范围，在该温度范围以内，通过单因素实验，对桃仁的炒制工艺进行优选，选用燀桃仁时间、炒制温度、炒制时间为考察因素，每个因素设置相应水平。以苦杏仁苷、乙醇浸出物、脂肪油含量与外观色泽加权综合评分为指标优化炒制工艺。
燀制时间的考察取净桃仁5份，每份100 g，置于沸水中，分别考察燀制时间1、3、5、7、9 min，在200℃下进行炒制4 min，取出晾凉，即得炒桃仁饮片。按照“2.6.4”项下质量评分规则评分，考察结果见表2。燀制时间为3 min时评分最高，所以最终选择1、3、5 min用于后续炒桃仁工艺优化。
炒制温度的考察取燀桃仁5份，每份100 g，置于炒药机中，以40℃为梯度，炒制温度分别为120、160、200、240、280℃，炒制4 min，取出晾凉，即得炒桃仁饮片。按照“2.6.4”项下质量评分规则评分，考察结果见表3。炒制温度为160℃时评分最高，所以最终选择120、160、200℃用于后续炒桃仁工艺优化。2.7.3
炒制时间的考察在“2.7.1”和“2.7.2”项确定的燀制时间（3 min）和炒制温度（160℃）下，分别考察炒制时间2、3、4、5、6 min，按照“2.6.4”项下质量评分规则评分，考察结果见表4。炒制时间为4 min时评分最高，所以最终选择3、4、5 min用于后续炒桃仁工艺优化。2.8
试验设计与结果根据单因素试验结果，选择燀制时间（X1）、炒制温度（X2）和炒制时间（X2）3个因素作为响应变量，利用Design Expert 13软件按照BBD-RSM法，以“2.6.4”项下方法得到的综合评分（Y）为响应值，通过响应面分析进行炮制工艺的优化，得到炒桃仁最优炮制条件，因素水平及响应面试验设计与结果见表5。
模型拟合由三维的立体模型图以及实验结果得到的相应的二次多项式回归模拟方程为Y＝93.21＋6.61X1－9.81X2－3.81X3＋2.36X1X2－3.85X1X3－3.37X2X3－16.69X12－12.34X22－10.02X32。R2＝0.994 3，说明该模型能解释99.43%响应值的变化，因此，该模型的拟合程度较好，试验误差小，可以用此模型做多元化的分析和预测。响应面结果的方差分析见表6。
各因素交互作用分析根据所得模型绘制燀制时间、炒制温度、炒制时间的交互作用，对炒桃仁炮制工艺影响的3D响应曲面与等高线。由Design-Export 13优化处理得到最佳炒桃仁炮制工艺参数为燀制时间3.08 min，炒制温度148.25℃，炒制时间3.85 min，预测综合评分为95.46。2.8.4炒桃仁工艺结果验证
根据软件得出最优结果，结合真实的操作，将炒桃仁炮制最佳工艺调整为燀制时间3.1 min，炒制温度148℃，炒制时间3.8 min，按此工艺条件重复3次实验，结果3次实验综合评分分别为95.35、95.09、95.98，得到平均综合评分为95.47，与预测值相接近，说明利用响应曲面法对炮制工艺拟合效果较好。炒桃仁工艺结果见表7。2.9桃仁炒制前后苦杏仁苷
”项下方法检验测试样品中的苦杏仁苷含量，乙醇浸出物含量按照“2.3”项下方法测定，脂肪油含量按照“2.4”项下方法测定，结果见表8。由结果可知，桃仁经炒制后，苦杏仁苷、乙醇浸出物、脂肪油含量均呈下降趋势，且苦杏仁苷（P＜0.05）和脂肪油（P＜0.01）含量具有非常明显性差异，说明在炒制加热过程中高温会使桃仁中主要成分含量降低。2.10
）炒桃仁的制备：取桃仁生品适量，运用响应曲面法得到的最佳炮制工艺炒制，即得炒桃仁。（2
）生、炒桃仁水煎液的制备：取生桃仁粉末适量，加入10倍量水，回流提取1 h，滤过，药渣继续提取1 h，滤过，合并滤液，滤液浓缩至生药质量浓度为0.8 g/mL的水煎液，备用。同法制备炒桃仁水煎液。
大鼠适应性饲养1周后，随机分组，每组8只，分别为空白组、模型组、阳性组（复方丹参片，0.384 g/kg）、生桃仁低剂量组（2.00 g/kg）、生桃仁高剂量组（8.00 g/kg）、炒桃仁低剂量组（2.00 g/kg）和炒桃仁高剂量组（8.00 g/kg）。给药剂量参考文献报道[15]。2.10.3模型的建立
参照文献方法[16]建立大鼠急性血瘀证模型。连续7 d ig给药后，除空白组外，其余各组均sc盐酸肾上腺素（0.8 mg/kg）共2次，2次间隔4 h，第1次sc盐酸肾上腺素2 h后将大鼠浸入冰水中5 min，第2次sc盐酸肾上腺素后，禁食不禁水24 h，末次给药1 h后，ip 2%戊巴比妥钠（2μL/g）麻醉，进行腹主动脉采血，肝素抗凝，采用全自动血液流变测试仪检测血流变学指标；随后1 500 r/min离心（离心半径8.3 cm）10 min得血浆，测定血浆黏度指标。用柠檬酸钠采血管采血2 mL
进行检测凝血四项：凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）、凝血酶时间（thrombin time，TT）、纤维蛋白原（fibrinogen，Fib）。取血后，处死大鼠，剥离肺和肝脏组织，冲洗干净，固定于4%多聚甲醛溶液中，石蜡包埋，切片，制作病理切片，采用HE染色，在显微镜下观察组织病理变化。2.10.4桃仁炮制前后对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响
与空白组大鼠相比，模型组大鼠在低、中、高切变率下全血黏度和血浆黏度均显著增高（P＜0.001）；与模型组比较，生桃仁低、高剂量组和炒桃仁低剂量组的低、中、高切变率下的全血黏度和血浆黏度均明显降低（P＜0.05、0.01、0.001），炒桃仁高剂量组全血黏度的低、中切变率和血浆黏度明显降低（P＜0.05、0.001）。生桃仁与炒桃仁同剂量组相比较，全血黏度的低切变率和血浆黏度的差异均有显著性（P＜0.05）。结果见表9。2.10.5
与空白组相比，模型组大鼠血浆的PT、APTT、TT明显降低，Fib明显地增加（P＜0.001）。与模型组相比，生桃仁低、高剂量组的APTT明显升高（P＜0.05），PT和TT明显地增加（P＜0.001），Fib明显降低（P＜0.001）；炒桃仁低剂量组PT和TT显著增加（P＜0.05），高剂量组的PT、APTT和TT均显著增加（P＜0.05），2个剂量组的Fib均明显降低（P＜0.01）。生桃仁高、低剂量组与炒桃仁同剂量组相比，PT、TT和Fib具有非常明显性差异（P＜0.05）。结果见表9。2.10.6桃仁炮制前后对急性血瘀模型大鼠肺组织病理结构的影响
如图4所示，空白组大鼠支气管周围、肺泡隔及血管壁可见少量红色的胶原纤维沉积,为肺间质的正常组织成分，肺泡腔呈空泡状薄壁结构，形态正常；模型组肺大范围出血，肺泡隔增厚明显，可见明显的肺泡上皮细胞坏死和脱落，局部可见肺间质水肿，炎性细胞浸润，肺损伤严重。给药后各组均有不同程度的改善，肺泡壁变薄，肺间质水肿和出血情况减少，且相同剂量下生桃仁组优于炒桃仁组。2.10.7桃仁炮制前后对急性血瘀模型大鼠肝脏组织病理结构的影响
如图5所示，空白组小鼠肝脏中的肝小叶结构清晰，肝细胞索排列整齐，少量炎性细胞浸润，肝窦间隙规则细胞结构。与空白组相比，模型组出现肝细胞气球样变、坏死、炎性细胞大量浸润、中央静脉瘀血等病理变化。给药后各组均有不同程度的改善，中央静脉充血、炎细胞浸润、肝细胞气球样变等病理状况得到一定的改善，其中，生桃仁高剂量组效果最好，优于炒桃仁相同剂量组。2.11桃仁炮制前后润肠通便作用的研究
）生、炒桃仁水煎液的制备：取生桃仁粉末适量，加入10倍量水，回流提取1 h，滤过，药渣继续提取1 h，滤过，合并滤液，滤液浓缩至生药质量浓度为1.0 g/mL的水煎液备用。同法制备炒桃仁水煎液。
小鼠适应性饲养1周后，随机分组，每组10只，分别为空白组、模型组、阳性组（多潘立酮片，0.5 mg/kg）、生桃仁低剂量组（0.83 g/kg）、生桃仁高剂量组（3.32 g/kg）、炒桃仁低剂量组（0.83 g/kg）和炒桃仁高剂量组（3.32 g/kg）。给药剂量按《中国药典》2025年版规定，桃仁的临床用量为5～10 g/d。以5 g计算，除以人的平均体质量60 kg，1 d的平均剂量为0.083 g/kg。小鼠按照人的剂量10倍进行计算，即0.83 g/kg，高剂量组为低剂量的4倍。2.11.3模型的建立
参照文献方法[17]建立小鼠燥结失水便秘模型。小鼠适应性饲养7 d后进行造模，第1～4天，空白组以常规饲料喂养，其余组喂食大米并禁水建立便秘模型。第5～8天，各组以常规饲料喂养，各给药组ig相应药物（0.01 mL/g），模型组ig等体积的生理盐水。造模后，空白组和模型组ig给予含2%墨汁的生理盐水，给药组则ig给予用药液配成的2%墨汁混悬液。给药后，观察记录每只小鼠首次排出黑粪的时间和4 h内小鼠排出的粪便粒数。处死小鼠，取空肠组织，冲洗干净，固定于4%多聚甲醛溶液中，石蜡包埋，切片，制作病理切片，HE染色，在显微镜下观察组织病理变化。2.11.4
便的影响由表10可知，空白组与模型组首次排黑便的时间和4 h排便粒数有显著性差异（P＜0.001）。与模型组相比，炒桃仁高、低剂量组，生桃仁高剂量组和阳性对照组均能明显缩短首次黑便排出时间和增加4 h排出粪便粒数，而生桃仁低剂量组无显著性差异。各给药组间差异分析表明，炒桃仁各剂量组与生桃仁相同剂量组相比，首次排黑便时间和4 h排便粒数有显著性差异（P＜0.05），表明炒桃仁的作用强于生桃仁。2.11.5桃仁炮制前后对燥结失水便秘模型小鼠空肠组织病理结构的影响
空白组小鼠空肠绒毛较长且分布紧密，杯状细胞数量正常，隐窝、黏膜结构清晰完整，无病理改变；模型组小鼠空肠绒毛明显断裂分散，同时伴有隐窝萎缩，杯状细胞缺失，组织内有炎性细胞浸润，有明显病理损伤。与模型组相比，生桃仁低剂量组小鼠的肠绒毛断裂分散，隐窝萎缩，杯状细胞减少，生桃仁高剂量组小鼠空肠绒毛断裂现象显著改善，但疏松；炒桃仁各剂量组空肠绒毛结构相对完整，分布较为紧密，同时隐窝结构较完整，杯状细胞增多。可以明显看出，炒桃仁效果优于生桃仁，结果如图6所示。返回搜狐，查看更加多
